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分子生物学技术

Molecular Biology Techniques

课程介绍 Course Introduction

学分:2(含实验) | 先修课:分子生物学、生物化学 | 学期:春季学期

本课程以实验操作为主,系统训练分子生物学常用实验技术。内容包括核酸提取与纯化、PCR扩增技术、琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切与DNA连接、感受态细胞制备与转化、质粒提取、实时荧光定量PCR、蛋白质表达与纯化、Western Blot等。课程强调实验原理与操作技能并重,培养学生独立完成分子生物学实验的能力及分析解决实验问题的能力。

This course focuses on laboratory training, systematically teaching common molecular biology techniques. Topics include nucleic acid extraction and purification, PCR amplification, agarose gel electrophoresis, restriction digestion and DNA ligation, competent cell preparation and transformation, plasmid extraction, real-time qPCR, protein expression and purification, and Western Blot.

大作业 Final Project

作业标题:分子生物学技术综合应用:基因检测与诊断 / Comprehensive Application of Molecular Biology Techniques: Gene Detection and Diagnosis

综合应用PCR、电泳、核酸杂交和基因测序技术,针对一种遗传病或病原体(如地中海贫血或新冠病毒)设计分子诊断方案,撰写完整检测报告。

Comprehensively apply PCR, electrophoresis, nucleic acid hybridization and gene sequencing techniques, design molecular diagnostic scheme for a genetic disease or pathogen (e.g., thalassemia or SARS-CoV-2), write complete detection report.

实施步骤 Implementation Steps

示例:建立一套完整的蛋白表达与纯化流程,比如表达His标签的绿色荧光蛋白。你需要设计引物扩增基因,构建pET-28a表达载体,用IPTG诱导BL21(DE3)表达,通过Ni-NTA亲和层析纯化蛋白,用SDS-PAGE和Western Blot验证纯度与表达量。
步骤 1
实验设计
设计实验方案和对照组
产出:实验方案
步骤 2
样品制备
处理和制备实验样品
产出:制备好的样品
步骤 3
实验操作
执行实验并记录结果
产出:实验记录
步骤 4
数据分析
统计分析实验数据
产出:数据分析报告
步骤 5
报告撰写
撰写实验报告和讨论
产出:实验报告

Steps

Step 1
Experimental Design
Design experiment and controls
Deliverable: Experiment Plan
Step 2
Sample Preparation
Prepare experimental samples
Deliverable: Prepared Samples
Step 3
Experiment Execution
Perform experiment and record
Deliverable: Lab Notes
Step 4
Data Analysis
Statistical analysis of results
Deliverable: Analysis Report
Step 5
Report Writing
Write lab report
Deliverable: Lab Report
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